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La lutéoline est un composé flavonoïde naturel, et voici quelques méthodes de détection courantes:
La chromatographie liquide haute performance est basée sur la différence des coefficients de distribution de différentes substances entre la phase stationnaire et la phase mobile pour la séparation. L'échantillon est injecté dans une phase mobile (généralement un solvant ou un solvant mixte), qui transporte l'échantillon à travers une colonne chromatographique remplie d'une phase stationnaire (comme le gel de silice). Différents composés se déplacent à différentes vitesses dans la colonne pour obtenir une séparation. Enfin, la lutéoline a été détectée à l'aide de détecteurs UV Vis, car elle a une longueur d'onde d'absorption des UV spécifique.
Préparation des échantillons: extraire et dissoudre les extraits de plantes ou d'autres échantillons contenant de la lutéoline dans des solvants appropriés (tels que le méthanol, l'éthanol, etc.), et effectuer des étapes de prétraitement telles que la filtration et la centrifugation pour éliminer les impuretés.
Réglage des conditions chromatographiques: sélectionnez une colonne chromatographique appropriée (telle que la colonne chromatographique en phase inverse C18), et la phase mobile peut être un système d'eau méthanol ou acétonitrile. Ajouter une quantité appropriée d'acide (comme l'acide formique, l'acide phosphorique) en fonction de la situation réelle pour améliorer l'effet de séparation. Le débit est généralement compris entre 0.8 et 1.5 mL/min, et la température de la colonne est généralement réglée à température ambiante ou à une température constante appropriée (telle que 30 à 40 ℃) selon les besoins. La longueur d'onde de détection est généralement fixée à environ 350nm, la longueur d'onde d'absorption maximale de la lutéoline.
-Injection et analyse: injecter l'échantillon traité dans le port d'injection du chromatographe, enregistrer le chromatogramme via un logiciel informatique et effectuer une analyse qualitative et quantitative de la lutéoline en fonction du temps de rétention et de la zone de pointe.
L'efficacité élevée de séparation peut séparer efficacementPoudre de lutéoline en vracÀ partir d'autres impuretés dans des échantillons complexes.
Haute sensibilité de détection, capable de détecter de faibles concentrations de lutéoline.
Les résultats sont précis, ont une bonne reproductibilité et conviennent à une analyse quantitative.
Inconvénients:
Les instruments et équipements sont coûteux et nécessitent des compétences professionnelles en maintenance et en fonctionnement.
Le temps d'analyse est relativement long, notamment pour la séparation d'échantillons complexes.
Combinant la capacité de séparation de la chromatographie liquide avec la sensibilité et la sélectivité élevées de la spectrométrie de masse pour l'identification. L'échantillon est d'abord séparé par chromatographie liquide, puis entre dans le spectromètre de masse. Le spectromètre de masse ionise les molécules et mesure le rapport masse/charge (m/z) des ions pour déterminer la masse de la molécule, identifiant ainsi la lutéoline. Pendant ce temps, une analyse quantitative peut être menée en fonction de la force des ions.
Prétraitement des échantillons: Semblable à la CLHP, l'échantillon doit être extrait et purifié pour éliminer les substances interférentes.
Réglages des paramètres de l'instrument: les paramètres de la section de chromatographie liquide sont fondamentalement les mêmes que ceux de HPLC, mais la sélection de la phase mobile doit tenir compte de la compatibilité avec la spectrométrie de masse. Le spectromètre de masse doit définir des paramètres tels que le mode d'ionisation (tel que l'ionisation par électrospray ESI ou l'ionisation chimique à pression atmosphérique APCI), la plage de balayage, le mode de détection (mode ion positif ou ion négatif), etc. Pour la lutéoline, de bons résultats de détection peuvent être obtenus en mode d'ions négatifs ESI.
Analyse et identification: injectez l'échantillon dans l'instrument, séparez-le d'abord par chromatographie liquide, puis obtenez le spectre de masse dans le spectromètre de masse. En comparant avec des bases de données de spectrométrie de masse connues de magnolol et en combinant des informations telles que le temps de rétention, la présence de magnolol est déterminée et la quantification est effectuée en fonction de l'intensité des pics de spectrométrie de masse.
Il a une sensibilité et une sélectivité élevées, et peut identifier avec précision la structure de la lutéoline.
Des traces de lutéoline dans des échantillons complexes peuvent également être efficacesY détecté.
Inconvénients:
L'instrument a un coût élevé et un fonctionnement complexe, nécessitant du personnel professionnel pour exploiter et analyser les données.
L'analyse des données de spectrométrie de masse nécessite un certain niveau de connaissances et d'expérience professionnelles.
Le système conjugué dans la structure moléculaire de la lutéoline peut absorber des gammes de longueurs d'onde spécifiques de la lumière visible ultraviolette. Selon la loi de Lambert Beer (A = ε bc, où A est l'absorbance, ε est l'absorptivité molaire, b est la longueur du chemin optique et c est la concentration de l'échantillon), dans une certaine plage de concentration, l'absorbance est proportionnelle à la concentration de lutéoline dans l'échantillon. La teneur en lutéoline peut être déterminée en mesurant l'absorbance.
Dessin de courbe standard: préparer une série de solutions standard de différentes concentrations en utilisant une concentration connue de lutéoline standard et mesurer l'absorbance à la longueur d'onde d'absorption maximale de la lutéoline (telle que 350nm) en utilisant un spectrophotomètre visible UV. Tracez une courbe standard avec une concentration comme axe des x et une absorbance comme axe y.
Détermination de l'échantillon: Diluez correctement l'extrait de l'échantillon d'essai, mesurez l'absorbance à la même longueur d'onde et calculez la teneur en lutéoline dans l'échantillon en fonction de la courbe standard.
L'instrument est simple, facile à utiliser et rentable.
Pour les échantillons à haute teneur en lutéoline, une détection rapide peut être effectuée.
Inconvénients:
Mauvaise sélectivité et susceptibilité aux interférences d'autres substances ayant des longueurs d'onde d'absorption similaires dans l'échantillon.
Ne peut pas distinguer efficacement entre la lutéoline et ses analogues structurels.
Placez l'échantillon sur une plaque en couche mince revêtue d'un adsorbant (tel qu'un gel de silice) et le développer sur la plaque en utilisant un agent de développement approprié (tel qu'un solvant mixte d'acide formique toluène acétate d'éthyle). Différents composés ont différentes capacités de désorption d'adsorption entre l'adsorbant et l'agent de développement, déplaçant ainsi différentes distances sur la plaque de couche mince pour obtenir une séparation. L'extrait d'Osmanthus peut être analysé qualitativement en comparant sa valeur Rf avec des échantillons standard, ou analysé semi quantitativement par l'intensité des taches après réaction de couleur.
Préparation ou achat de panneaux de couche mince: vous pouvez préparer votre propre panneau de couche mince de silicone ou acheter des panneaux de couche mince disponibles dans le commerce.
Échantillonnage d'échantillon: Dissoudre l'échantillon dans un solvant approprié et utiliser une microseringue ou un capillaire pour repérer l'échantillon sur la ligne de départ de la plaque à couche mince.
Dépliage et développement des couleurs: placez la plaque en couche mince dans un cylindre en développement contenant un agent de développement et dépliez-la. Une fois que le bord avant de l'agent de développement a atteint une certaine distance, retirez la plaque en couche mince et séchez-la à l'air. Ensuite, des réactifs de couleur appropriés (tels que le réactif de trichlorure d'aluminium) sont utilisés pour le développement de la couleur, et la réaction entre la lutéoline et le trichlorure d'aluminium entraînera des taches fluorescentes sous la lumière UV. La position et l'intensité du spot sont observées sous la lumière UV.
L'équipement est simple, l'opération est rapide et le coût est faible.
Plusieurs échantillons peuvent être préalablement criblés et séparés simultanément.
Inconvénients:
Quantification inexacte, principalement utilisée pour l'analyse qualitative ou semi quantitative.
L'effet de séparation est relativement faible et il peut ne pas être possible de séparer complètement la lutéoline et d'autres composants d'échantillons complexes.
